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关于惠利得 HLD-DY500 电泳仪凝胶制备出现气泡的成因、预防与消解全攻略

在制备聚丙烯酰胺凝胶的过程中，胶体内出现大小不等的气泡，是常见的困扰。这些气泡不仅影响凝胶的均一性和强度，更会在电泳时干扰电场，导致条带弯曲、出现异常的垂直条纹或泳动阻滞，严重影响结果分析。理解气泡的来源并掌握消解技巧至关重要。

气泡产生的多源头分析

气泡的本质是气体（通常是空气）被包裹在液态的胶溶液中，并在聚合前未能逸出。其主要来源包括：

1. 溶液配制与混合过程：

   • 剧烈摇晃或涡旋：为了快速溶解药品或混匀溶液，采取剧烈的摇晃、涡旋动作，会将大量空气卷入溶液中，形成密集的小气泡。

   • 移液操作不当：使用移液器吸取或吹打胶液时速度过快，尤其在最后吹出阶段，容易产生气泡。

2. 灌胶操作过程：

   • 倾倒速度过快、不稳：灌胶时，将胶液从容器直接“倾倒”或“倒入”玻璃板夹层，液流不稳定，会裹入空气。

   • 沿玻璃板直接倾倒：胶液直接冲击玻璃板，容易产生飞溅和气泡。

   • 凝胶板夹角的影响：胶液流入两块玻璃板形成的狭小空间时，由于毛细作用和液体前沿的张力，有时会封入空气，尤其在底部和两侧。

3. 环境与化学因素：

   • 温度变化：胶液温度与室温差异较大时，溶解的气体可能因溶解度变化而析出，形成微小气泡。

   • 聚合起始剂的加入：加入TEMED后，若不轻柔混匀，也可能引入新的气泡。

系统性预防与消解策略

预防胜于处理，应从每个环节杜绝气泡产生。

1. 溶液配制阶段：

   • 配制单体储存液（如30%丙烯酰胺）时，可轻微加热助溶，但使用前需恢复至室温并静置。

   • 混匀时，采用缓慢、温和的“颠倒混匀”或使用磁力搅拌器低速搅拌，严禁涡旋振荡。

   • 配制好的工作胶液，可在加入促凝剂前，静置数分钟，让已存在的大气泡自然上浮破裂。

2. 灌胶操作阶段（关键步骤）：

   • 使用合适的工具：使用一次性塑料注射器（去掉针头） 或带有细长尖嘴的专用灌胶瓶来转移和灌入胶液。这提供了平稳、可控的液流。

   • 正确的灌胶角度与路径：将玻璃板夹层倾斜约30-45度角。将灌胶工具的尖嘴深入两块玻璃板之间的缝隙，抵住其中一块玻璃板的内壁，然后缓慢、匀速地推出胶液，让胶液沿玻璃板内壁平缓流下，并逐渐抬高工具尖端，始终让尖端埋在液面以下。这样可以完美地排出前方空气，避免气泡产生。

   • 顶部水封：灌好分离胶后，需要用水或异丙醇进行水封以压平胶面。必须沿玻璃板一侧，极其缓慢地叠加在水封液上方，让其自然流下覆盖胶面，避免冲击产生气泡。

3. 气泡的应急处理：

   • 如果在灌胶过程中发现已引入明显气泡，可立即用细长的钩针或拉直的回形针，轻轻将气泡引导至胶液边缘或顶部，使其逸出。

   • 聚合前的小气泡，有时可以用轻轻敲击或震动制胶架的方式，帮助其上升。

   • 对于已聚合在凝胶内部、无法移除的小气泡，如果不在上样孔或主要分离区域，有时可忽略。如果位置关键，则建议重新制胶。

通过精细化操作和采用正确的工具与技巧，完全可以制备出清澈无泡、质地均一的完美凝胶，为高质量电泳奠定物质基础。

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